系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。WFh检测VBA
其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部位。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、与柱或保护住、柱温控制器等，现代HPLC仪还有微机控制系统，进行自动化仪器控制和数据处理。WFh检测VBA
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下面就介绍下高效液相色谱使用中的几个重要环节吧。WFh检测VBA
实验前的准备工作WFh检测VBA
1.过滤流动相。为了保证流动相洁净，流动相使用前都必须微膜过滤。WFh检测VBA
2.流动相脱气。为了避免流动相中气泡对仪器（气泡可能会对仪器及相关设备的正常使用及寿命产生一定影响）及分析结果的影响。WFh检测VBA
3.运行液相泵前尽量先清洗泵柱塞部件。清洗液一般采用10%甲醇溶液，也有采用10%异丙醇溶液WFh检测VBA
（5%甲醇或异丙醇等有机相溶液能避免微生物污染，但浓度不能太高，高于20%缓冲液可能会导致盐结晶析出，碰到酸碱类物质可能会有比较强烈的反应；另外异丙醇粘度较大，清洗能力较强；也有采用纯水清洗的，这样如果仪器每天使用还行，如果长期不用，为了防止微生物繁殖，纯水还得用含有有机相的清洗液置换出去）WFh检测VBA
冲洗，这是为了保护泵柱塞和密封圈等部件在泵运行时不被结晶盐等磨损而导致泵头漏液。WFh检测VBA
4.每天运行仪器前先排气。一般的液相色谱仪都有排气功能，没有的可以不接色谱柱开机运行几分钟排气。WFh检测VBA
5.泵运行时尽量不采用大流量模式（主要是换流动相或排气泡等，流量尽量设为3.0ml/min以内，这样更有利于保护泵柱塞杆和密封圈等部件的寿命）。WFh检测VBA
6.分析前先对色谱系统（整个流路）进行冲洗及平衡，尤其是色谱柱。先用纯甲醇冲洗30分钟，再换10%甲醇水溶液冲洗30分钟，最后换含缓冲盐或酸碱类物质的流动相平衡30分钟。色谱柱如果长期没用，每一步冲洗、平衡量尽量为色谱柱柱容量20倍以上）。WFh检测VBA
如果流动相中不含缓冲盐或酸碱类物质，纯甲醇冲洗完可直接换为流动相。使用色谱柱前知道或怀疑色谱柱中残留有或酸碱盐类物质，在用纯甲醇冲洗前增加一步10%甲醇水溶液冲洗。WFh检测VBA
7.如果色谱柱需要控温（升温），要先运行泵后再设柱温箱温度。WFh检测VBA
8.待仪器运行稳定后（基线基本走平后，这个是经验值），方可进样。WFh检测VBA
样品前处理WFh检测VBA
1.样品浓度不要太大，杂质不要太多，否则色谱柱处理起来压力很大。WFh检测VBA
2.进样前样品一定得先经微膜（一般采用0.22um或0.45um微膜）过滤。WFh检测VBA
实验过程中注意事项WFh检测VBA
1.为了避免进样器残留影响，进样前先对进样器进行清洗（这个不是必须的，但尽量是每进一针样品或标准品前都清洗进样器和进样针，当然同一样品也可以不洗，不同样品尽量洗），清洗顺序为纯水、甲醇、流动相。WFh检测VBA
2.每进一针样品后要对系统进行一次冲洗、平衡后再进下一针样品（等度要求不高，梯度要求相对高，主要是冲洗色谱柱中残留的强保留物质）。WFh检测VBA
实验完毕的后续工作WFh检测VBA
1.做完样要先清洗进样器，清洗顺序为纯水、甲醇。WFh检测VBA
2.关闭柱温箱温度设置。WFh检测VBA
3.冲洗色谱系统及色谱柱。先用10%甲醇水溶液冲洗30分钟后换为纯甲醇冲洗30分钟，待基线基本走平停泵。如果流动相中不含缓冲盐或酸碱类物质，冲洗时流动相可直接换为纯甲醇。色谱柱用完后如果长时间内不会再用，纯甲醇冲洗量要大于色谱柱柱容量20倍以上的，冲洗后卸下，两端密封保存。WFh检测VBA
4.待色谱柱温度降至接近于室温时再停泵、关机（这一点需特别注意，目的是防止温度过高损坏色谱柱）。WFh检测VBA
5.关机前用清洗液清洗柱塞杆。WFh检测VBA
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标签: 液相色谱仪
液相色谱仪有关高效液相色谱仪的使用_液相色谱仪
一）压力异常 WFh检测VBA
操作压力的变化往往是故障的征兆。
A、没有压力显示，没有流动相流动：WFh检测VBA
原 因 解决方法
1、电源问题接通电源，开机
2、保险丝被烧坏 更换保险丝
3、控制器设定不正确或设定失败采取恰当的设定、、修理或更换控制器
4、柱塞杆折断 更换柱塞杆
5、泵头内有空气 溶剂脱气、启动泵抽出空气
6、流动相不足 补充流动相、更换入口滤头
7、单向阀损坏 更换单向阀
8、漏液 拧紧或更换手紧接头WFh检测VBA
B、流动相流动正常，但没有压力显示：
原 因 解决方法
1、仪表损坏更换仪表
2、压力传感器损坏更换压力传感器WFh检测VBA
C、压力持续偏高
原 因 解决方法
1、流速设定过高 调整流速设定
2、柱前筛板堵塞 反冲色谱柱、更换筛板、更换色谱柱
3、流动相使用不当或缓冲盐的结晶沉淀使用恰当的流动相、冲洗柱塞杆。
4、色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱
5、进样阀损坏 清洗或更换进样阀
6、柱温过低提高温度
7、控制器失常 修理或更换控制器
8、保护柱阻塞 清洗或更换保护柱
9、在线过滤器阻塞清洗或更换在线过滤器WFh检测VBA
D、 压力持续偏低：
原 因 解决方法
1、流速设定过低 调整流速
2、系统漏液确定漏液位置并维修
3、色谱柱选择不当选择恰当的色谱柱
4、柱温过高降低温度
5、控制器失常 维修或更换控制器WFh检测VBA
E、 压力波动：
原 因解决方法
1、泵中有气体 溶剂脱气、从泵中除去气体
2、单向阀损坏 更换单向阀
3、泵密封损坏 更换泵密封
4、脱气不充分 重新过滤一遍、溶剂脱气
5、系统漏液 确定漏液位置并维修
6、使用梯度洗脱由于流动相粘度的变化引起的压力波动WFh检测VBA
二） 漏 液
通常可以通过拧紧或更换管路接头来解决漏液的问题。但值得注意的是过份拧紧会导致金属接头的漏液和塑料接头的磨损。如果通过稍微拧紧接头不能解决漏液的问题，就必须将接头取下，检查是否损坏（例如，卡套损坏、密封表面有杂质）；损坏的接头应该更换掉。
A）接头处漏液
原 因 解决方法
1、接头松动 拧紧
2、接头磨损 更换
3、接头过紧 拧松，再重新拧紧、更换
4、接头被污染 拆下清洗、更换
5、部件不匹配 使用同一品牌的配件
B）泵漏液
原 因 解决方法
1、单向阀松动 拧紧单向阀（不必拧的过紧）、更换单向阀。
2、接头松动 拧紧接头（不必拧的过紧）
3、混合器密封损坏 更换混合器密封、更换混合器。
4、泵密封损坏 维修或更换泵密封件
5、压力传感器损坏 维修或更换压力传感器
6、脉冲阻尼器损坏 更换脉冲阻尼器
7、比例阀损坏 检查隔膜，如果漏液立即更换、检查手紧接头，损坏的立WFh检测VBA
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