适用：利用酶联免疫吸附测定法用于食品及饲料中三聚氰胺的定量测定。检测原理：酶联免疫吸附测定法定量测定三聚氰胺残留。利用萃取液通过均质及振荡的方式提取样品中的三聚氰胺进行免疫测定。先将三聚氰胺酶
适用：bbk检测VBA
利用酶联免疫吸附测定法用于食品及饲料中三聚氰胺的定量测定。bbk检测VBA
检测原理：bbk检测VBA
酶联免疫吸附测定法定量测定三聚氰胺残留。利用萃取液通过均质及振荡的方式提取样品中的三聚氰胺进行免疫测定。先将三聚氰胺酶标记物，样品萃取物及标准加入到已经包被有三聚氰胺抗体的微孔中开始反应。在30分钟的孵育过程中，样品萃取物中的三聚氰胺与三聚氰胺酶标记物竞争结合微孔中的三聚氰胺抗体，孵育30分钟后洗掉小孔中所有没有结合的三聚氰胺及三聚氰胺酶标记物。再用去离子水清洗结束后，每孔中加入清澈的底物溶液，结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物质。孵育30分钟后停止此反应，根据各孔颜色深浅进行数据读取。依据标准的颜色得出样品中三聚氰胺的的浓度值。bbk检测VBA
设备及材料：bbk检测VBA
1、具有450nm的酶标分析仪bbk检测VBA
2、8头或12头洗板机(选配)bbk检测VBA
3、三聚氰胺检测试剂盒bbk检测VBA
4、可吸取50ul的移液器及吸头及.吸水纸bbk检测VBA
5、蒸馏水或去离子水bbk检测VBA
6、 20mM PBS： 0.62g NaH2PO4-2H2O+5.73gNa2HPO4-12H2O+9gNaCl ,蒸馏水定容至1000ml.bbk检测VBA
7、清洗液：0.62g NaH2PO4-2H2O+5.73gNa2HPO4-12H2O+9gNaCl ,蒸馏水定容至1000ml.+0.5ml 土温20样品bbk检测VBA
饲料前处理：(稀释倍数：20)bbk检测VBA
1、称1g饲料样品，加入4ml甲醇；bbk检测VBA
2、震荡1min，加入0.1g氯化钠；bbk检测VBA
3、4000转离心5min；bbk检测VBA
4、取上清液0.2ml加入到0.8ml 20mMPBS中，混匀。bbk检测VBA
5、取150ul测定。bbk检测VBA
检测：bbk检测VBA
1、先将三聚氰胺酶标记物50ul，样品150ul及标准150ul加入到已经包被有三聚氰胺抗体的微孔中开始反应。bbk检测VBA
2、在30分钟的孵育过程中，样品萃取物中的三聚氰胺与三聚氰胺酶标记物竞争结合微孔中的三聚氰胺抗体；bbk检测VBA
3、孵育30分钟后用清洗液洗掉小孔中所有没有结合的三聚氰胺及三聚氰胺酶标记物。清洗四次后，放在桌上用吸水纸吸掉微孔板里多余的水份；bbk检测VBA
4、清洗结束后，每孔中加入100ul清澈的底物溶液，结合的酶标记物将无色的底物转化为蓝色的物质。bbk检测VBA
5、孵育30分钟后加入100ul 停止液STOP停止此反应，根据各孔颜色深浅进行数据读取。依据标准的颜色得出样品中三聚氰胺的的浓度值bbk检测VBA
结果分析：bbk检测VBA
1、半定量的结果是由样品的吸光率与标准的吸光率的简单对比而来判定：样品的颜色比标准的颜色浅，则三聚氰胺的浓度比标准样的浓度高，样品的颜色比标准的颜色深则三聚氰胺的浓度比标准样的浓度低。bbk检测VBA
2、定量分析需要绘制以标准样的吸光率为X轴,以标准样的浓度的半对数为Y轴的曲线图。依据标准样。吸光率的点画成一直线,如此样品的光吸收率可在线上找到,与此相对应的Y轴则为样品的浓度,样品光吸收率。范围应比标准样的最底范围高,比最高范围低, 即可说明此样品中三聚氰胺的含量大于500ppb或小于20ppb。bbk检测VBA
特点：bbk检测VBA
本产品为酶联免疫吸附测定法(ELISA)法，灵敏度高、检测成本低，可适用于生产及检验单位大批量快速筛查。bbk检测VBA
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bbk检测VBA 酶标仪在临床实验方面应用广泛，用于鉴别乙肝两对半，HIV，鉴定DNA等许多方面，可以说它是临床及医学实验不可或缺的基础设备。bbk检测VBA
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故障一：测量的结果重现性不好，即使用空板测量误差也在允许的范围之外。bbk检测VBA
故障分析：检查试剂发现没有问题，检查判定公式也没有问题，检查光路也没有污染。几经周折终于发现卡微板的卡簧在伸缩后没有卡到位，造成微板在测量时在机内晃动影响测量结果不准。bbk检测VBA
故障二：测量结果OD值偏低。bbk检测VBA
故障分析：排除完灯的能量值偏低后，检查发现滤光片上有灰尘，用蒸馏水和擦镜纸擦洗干净晾干后故障排除。bbk检测VBA
测试方法：酶标仪的仪器指标在蕞佳状态，就仪器的精度测试和仪器的线性度介绍几种测试方法。bbk检测VBA
精度测试：该过程可被用于检测不同微板之间的测量精度。bbk检测VBA
使用新制备的在0.1％ TWEEN20中的橘黄色甲基填充微孔，在每个微孔中使用不同稀释度的溶剂以便获得一个光密度范围，首先确保每孔注入200mL液体，使用492nm虑光片测量至少3次，对每一微孔进行下列计算：bbk检测VBA
(1)平均OD值；(2)蕞高和蕞低值；(3)平均值。蕞高和蕞低值之间的差值和百分比。读数范围在0．000到2．000Abs。同一孔平均值，蕞高值和蕞低值之间的差值应该在+／一1．0％和+／一0．010OD范围内。bbk检测VBA
读数范围在2．000到3．000Abs同一孔平均值，蕞高和蕞低值之间的差值应在+／一1．0％ 和+／一0．005OD值范围内。读数范围在3．000Abs以上时准确度不符合要求。bbk检测VBA
酶标仪仪器线性度：仪器的线性度可使用一种溶剂的稀释系列得到。如可在492 nIn处测量在0．1％TWEEN20中的橘黄色甲基的稀释系列。bbk检测VBA
具体方法如下：在参考光密度计上测量被稀释的溶剂，画出OD值对已知浓度的点图，并画出通过这些点的蕞好的直线。将从系列稀释中测得的吸光度值与该图比较从而计算出各稀释度的浓度。微板中每种稀释度加入250t,-L，对每种稀释至少使用两个样本，以便降低因加样引起的误差。 测量微板使用精确测量模式，利用测量得到的平均OD值和每个样本的已知浓度画一条OD浓度的曲线，从系列稀释中测得的吸光值与该曲线比较从而计算出各稀释度的浓度。bbk检测VBA
对光度记和本仪器，比较计算的浓度，不准确度不应大于以下，使用标准滤光片492nm时吸光度在0．000～2．000Abs+／一1％、2．000～3．000Abs+／一1．5％。使用梯度滤光片492nm时，吸光度在0．000～2．500Abs+／一2％。bbk检测VBA
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