高效液相色谱仪（HPLC）现已成为有机化学分析的重要手段之一。同样，在食品分析中，无论是残留分析还是成分分析，HPLC也已成为不可或缺的分析仪器。和其它分析仪器一样，你若想让HPLC很好地为你工作、得到可靠的数据，首先你要保养好它，使它处于一个良好的待机状态，这样你操作它进行分析时就可以比较顺利地获得理想的结果。 流动相脱气对于避免HPLC系统出问题，顺利得到一个理想的数据是一个很有效的措施。HPLC系统内是不能够有气泡存在的。HPLC泵在输送液体时要产生很大的压力，由于气体的压缩比与液体相比大的多，因而当气泡存在时，你将观察到瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大，液相泵将不能输送任何溶剂，而且如果压力低于预先设定的压力低限，泵将停止工作。有些泵设计可以很好地排除气泡，而也有一些泵设计当气泡存在时将停止运转。 常用的脱气方法有如下几种： 1、吹氦脱气法。 利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性，在0.1MPa压力下，以约60 mL/min流速通入流动相储液容器中10～15min，可以很有效地从流动相中排除溶解的空气，能排除接近80%的氧气。采用一个高效分布式喷射流装置，一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排除。这意味着1L氦气通过1L流动相就可完成排气这个工作。这种脱气方法虽然好，但我们国内氦气价格较高，很少有实验室采用此方法。 2、加热回流法。 此法的脱气效果较好。在操作时要注意冷凝塔的冷却效率，否则溶剂会丢失，混合流动相的比例会有变化。 3、抽真空脱气法。 此法可使用真空泵，降压至0.05～0.07MPa即可除去溶解的气体。但是由于真空脱气会使混合溶剂组成发生变化，从而影响到实验的重现性，因此多用于单溶剂体系的简单分析。 4、超声波脱气法。 将欲脱气的流动相置于超声波清洗器中，用超声波震荡10～20min。此法的脱气效果最差。 5、在线脱气法。 现在商品的HPLC仪器，均可配在线脱气机。在线脱气使用简单，低故障，有效。建议购买仪器时一定要购买，有的公司是作为选购件，所以与仪器公司谈配置时应与公司确认。isY检测VBA
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高效液相色谱仪高效液相色谱仪常用脱气方法_高效液相色谱仪
色谱柱是高效液相色谱的心脏，在高效液相色谱仪的使用中，保持色谱柱的柱效、容量和渗透性，延长柱子的使用寿命非常重要。色谱柱压升高一般是由于柱床内产生了杂质，造成流体阻力加大所致。这两个原因，大致又可以分为以下几方面：isY检测VBA
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1、流动相的前处理isY检测VBA
杂质堵塞色谱柱进口滤片，导致压力升高。这是由于流动相可能没有过滤，或过isY检测VBA
滤不彻底，使固体杂质滞留于滤板上所致。isY检测VBA
2、样品的沉淀isY检测VBA
当溶解样品的溶剂与流动相不一致时，样品进入色谱柱时，可能因溶解度降低而沉淀出来，isY检测VBA
造成压力升高。isY检测VBA
3、晶体的析出isY检测VBA
使用含有缓冲液的流动相时，缓冲液中的无机盐可能会残留在体系之中，它们会因在新流动isY检测VBA
相中的溶解度降低而析出，造成流体阻力加大、压力升高。isY检测VBA
4、细菌或霉菌孳生isY检测VBA
霉菌在流动相中、管路中或柱子进口处繁殖、生长堵塞滤板，导致压力升高。所以在使用磷isY检测VBA
酸盐缓冲液时一般要现配现用。isY检测VBA
5、溶质吸附isY检测VBA
当溶质在柱子上有较强的吸附，且所用的流动相难以将它们洗脱时，累积的未洗脱溶质也会isY检测VBA
造成阻力增大和压力升高。isY检测VBA
6、流动相更换过度较快isY检测VBA
当改变流动相体系时，不彻底的更换使不同性质、互不混溶的流动相存在于同一个体系之中，也会造成压力升高。isY检测VBA
7、压力脉冲isY检测VBA
运行过程中，有时会产生系统内压力的突然升降。如此所形成的压力脉冲会造成多孔填料的isY检测VBA
崩坏和柱床结构的微小变化，填料微屑的长期积累也可能会使柱床阻力增大，造成压力升高。isY检测VBA
处理对于缓冲液盐分如(乙酸铵等)沉积于柱内的情况先用40～50℃的纯水,低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后,相应提高流速冲洗,柱压大幅度下降后,用常温纯水冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟;isY检测VBA
对于样品污染沉积的情况,由样品的沉积引起污染的C18柱,和纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子(冲洗时间的长短由样品污染的情况而定),再用换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,最后甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。isY检测VBA
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