荧光分光
光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等很多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定,不但可以做一般的定量分析,而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm,发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品(如凝胶条)的光谱扫描。
由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中,激发样品中的荧光物质发出荧光,荧光经过滤过和反射后,被光电倍增管所接受,然后以图或数字的形式显示出来。hl1检测VBA
基本结构和原理,光源与检测器成直角方式安排。hl1检测VBA
1.光源:hl1检测VBA
为高压汞蒸气灯或氙弧灯,后者能发射出强度较大的连续光谱,且在300nm~400nm范围内强度几乎相等,故较常用。hl1检测VBA
2.激发单色器:hl1检测VBA
置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器,筛选出特定的激发光谱。hl1检测VBA
3.发射单色器:hl1检测VBA
置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器,常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱。hl1检测VBA
4.检测器:hl1检测VBA
一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。hl1检测VBA
5.样品室:hl1检测VBA
通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。丈量液体时,光源与检测器成直角安排;丈量固体时,光源与检测器成锐角安排。hl1检测VBA
标签: 荧光分光光度计
荧光分光光度计荧光分光光度计基本结构和原理_荧光分光光度计
紫外可见分光光度计是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。紫外光区通常用氢灯或氘灯。见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。hl1检测VBA
色散元件有棱镜和光栅两种。可见光区的测量用玻璃吸收池,紫外光区的测量须用石英吸收池。检测器的功能是通过光电转换元件检测透过光的强度,将光信号转变成电信号。常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器。分光光度计的分类方法有多种:按光路系统可分为单光束和双光束分光光度计;按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计;按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。hl1检测VBA
仪器电源接通后,光源不亮。hl1检测VBA
原因:hl1检测VBA
①光源灯泡已损坏。hl1检测VBA
②保险管烧坏。hl1检测VBA
处理方法:hl1检测VBA
①更换氘灯或钨灯。hl1检测VBA
②更换保险管。hl1检测VBA
紫外可见分光光度计噪音较大。hl1检测VBA
原因:hl1检测VBA
光源灯泡使用时间超过寿命期。hl1检测VBA
处理方法:hl1检测VBA
更换光源灯泡。hl1检测VBA
自检时提示波长自检出错。hl1检测VBA
原因:hl1检测VBA
自检过程中可能打开过仪器样品室的盖子。hl1检测VBA
处理方法:hl1检测VBA
关上仪器样品室盖子,重新自检。hl1检测VBA
仪器自检时提示通讯错误。hl1检测VBA
原因:hl1检测VBA
仪器与电脑之间的数据线没有连接好。hl1检测VBA
处理方法:hl1检测VBA
连接好数据线,重新打开仪器和软件,重新自检。hl1检测VBA
仪器零点飘忽不定,主要反映在简易仪器上。hl1检测VBA
原因:hl1检测VBA
在简易仪器中,零点往往是通过电位器来调整,这种电位器一般是炭膜电阻制作的,使用久了往往造成接触不良。hl1检测VBA
处理方法:hl1检测VBA
更换电位器。hl1检测VBA
在使用过程中,出现数字显示不能归零,同时伴有图线记录基线位置偏高。hl1检测VBA
原因:hl1检测VBA
①光电倍增等老化,性能降低。hl1检测VBA
②信号处理板可能发生故障。hl1检测VBA
③前置放大版出现故障,引起反馈量增大hl1检测VBA
处理方法:hl1检测VBA
①开机通电,先做记录故障曲线,再与原始记录的标准曲线对照,找出异同点,并作一下定性定能分析。然后用一只同型号规格的新光电倍增管替换机上的光电管,再开机实验,结果记录出来的图线并没有什么变化,由此证明光电倍增管没有老化变质。hl1检测VBA
②进一步检查信号处理板,未发现信号处理板各元器件损坏,对影响灵敏度有关的电位器检测,结果测得数据正常,这说明信号处理板没有故障。hl1检测VBA
测试过程中提示能量太低。hl1检测VBA
原因:hl1检测VBA
①光源灯泡使用时间超过寿命期。hl1检测VBA
②样池中有不透光的东西挡住了光。hl1检测VBA
处理方法:hl1检测VBA
①更换光源灯。hl1检测VBA
②拿走挡光的物品。hl1检测VBA
吸光值结果出现负值(常见)。hl1检测VBA
原因:hl1检测VBA
没做空白记忆、样品的吸光值小于空白参比液。hl1检测VBA
处理方法:hl1检测VBA
做空白记忆、调换参比液或用参比液配置样品溶液。hl1检测VBA
当仪器波长固定在某个波长下时,吸光值信号上下摆动,特别是测量模式转换为按键开关式的简易仪器。hl1检测VBA
原因:hl1检测VBA
开关触点因长期氧化所致造成接触不良。hl1检测VBA
处理方法:hl1检测VBA
用金属活化剂清洗按键触点即可。hl1检测VBA
样品信号重现性不良hl1检测VBA
原因:hl1检测VBA
排除紫外可见分光光度计本身的原因外,大的可能是样品溶液不均匀所致,在简易的单光束仪器中,样品池架一般为推拉式的,有时重复推拉不在同一个位置上。hl1检测VBA
处理方法:hl1检测VBA
①采取正确的试样配置手段。hl1检测VBA
②修理推拉式样品架的定位碰珠。hl1检测VBA