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可见分光光度计的原理如何光度计工作原理

时间：2025-04-12 11:20:45 来源：作者：

可见分光光度计广泛应用于医药卫生、临床检测、生物化学、石油化工、环保监测、食品生产和质量控制等部门作定性、定量分析，还可作为大、专院校和中学相关课程的教学演示和实验仪器。CV7检测VBA

分光光度计是目前化验室中使用比较广泛的一种分析仪器，其测定原理是利用物质对光的选择性吸收特性，以较纯的单色光作为入射光，测定物质对光的吸收，从而确定溶液中物质的含量。CV7检测VBA

其特点是灵敏度高；准确度高；测量范围广；在一定条件下，可同时测定水样中两种或两种以上的物质组分含量等。CV7检测VBA

分光光度计按其波长范围可分为可见分光光度计(工作范围360～800nm)、紫外-可见分光光度计(工作范围200～1000nm)和红外分光光度计(工作范围760～400000nm)等。CV7检测VBA

可见分光光度计的原理是：CV7检测VBA

当一束单色光照射待测物质的溶液时，当某一定频率(或波长)的可见光所具有的能量(hf)恰好与待测物质分子中的价电子的能级差相适应(即ΔE=E2-E1=hf)时，待测物将对该频率(波长)的可见光产生选择性的吸收。CV7检测VBA

用可见分光光度计可以测量和记录其吸收程度(吸光度)。CV7检测VBA

由于在一定条件下，吸光度A与待测物质的浓度C及吸收地长度l的乘积成正比，即A=KCL，所以，在测得吸光度A后，可采用标准曲线法、比较法以及标准加入法等方法进行定量分析。CV7检测VBA

可见分光光度计是一种结构简洁、使用方便的单光束分光光度计，基于样品对单色光的选择吸收特性可用于对样品进行定性和定量分析。CV7检测VBA

其定量分析根据相对测量原理工作，即选定样品的溶剂(或空气)作为标准试样，设定其透射比为100%，被测样品的透射比则相对于标准试样(或空气)而得到；CV7检测VBA

在一定的浓度范围，各参量遵循朗伯—比耳定律：A=lg1/T=KCLCV7检测VBA

T=I/I0CV7检测VBA

A:吸光度CV7检测VBA

T:相对于标准试样的透射比CV7检测VBA

I:光透过被测样品后照射到光电传感器上的强度I0:光透过标准试样后照射到光电传感器上的强度CV7检测VBA

K:样品溶液的比消光系数CV7检测VBA

L:样品溶液在光路中的长度CV7检测VBA

C:样品浓度CV7检测VBA

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紫外可见光光度计的测试

我们该如何使用紫外可见光光度计进行杂光散光测试呢?下面跟我一起来了解一下吧。CV7检测VBA

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据了解，有的紫外可见光光度计只测试220nm处的杂散光，不测试340nm处的杂散光，这样是不正确的，需测试220nm处杂散光是因为：CV7检测VBA

①根据仪器学理论中的电光源理论，氘灯在220nm处能量很小，即信号很小，容易显现杂散光;CV7检测VBA

②根据仪器学理论中的光电发射理论，光电倍增管在220nm处的光谱响应(灵敏度)低，容易显现杂散光。CV7检测VBA

③根据量子光学理论，波长是能量的倒数，波长短能量大，容易产生杂散光，而220nm处属于短波部分;CV7检测VBA

而测试340nm处杂散光的原因是完全不同的，因为340nm处一般是氘灯换钨灯和仪器调换滤光片的地方，此时最容易产生杂散光。所以，对于紫外可见光光度计来讲，应该测试220nm和340nm两处的杂散光。CV7检测VBA

紫外可见光光度计杂散光测试步骤：CV7检测VBA

1、首先将参比液注入配对石英石吸收池，分别放置在参比池座和试样池座内。再测定波段扫描基线并使之平滑。CV7检测VBA

2、将减光片插入试样光路的滤光片槽内，其读数即为减光片的衰减值K，然后将减光片插入参比光路的滤光片座内，CV7检测VBA

3、将石英吸收池中的蒸馏水依次换成上述截止滤光液，插入试样试样池座中，在相应的波段内扫描、打印;在记录纸的作标上量取测定波长处的透光度，乘以衰减值K，即得各测定波长处的杂散光值。CV7检测VBA

紫外可见光光度计仪器设计的理论依据是比耳定律。研究的是物质对光的吸收。比耳定律的真正物理意义可以描述为：当一束平行的单色光通过某一均匀的有色溶液时，溶液的吸光度与溶液的浓度和光程的乘积成正比。它是吸收光度分析中定量分析的最基础、最根本的依据，更是紫外可见光光度计的基础的原理。CV7检测VBA

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标签: 光度计

光度计紫外可见光光度计的测试_光度计

荧光分光光度计的优缺点

　　荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等许多物理参数，从各个角度反映了分子的成键和结构情况。CV7检测VBA

　　荧光分光光度计的基本原理：CV7检测VBA

　　由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。物质荧光的产生是由在通常状况下处于基态的物质分子吸收激发光后变为激发态, 这些处于激发态的分子是不稳定的,在返回基态的过程中将一部分的能量又以光的形式放出，从而产生荧光。CV7检测VBA

　　不同物质由于分子结构的不同,其激发态能级的分布具有各自不同的特征，这种特征反映在荧光上表现为各种物质都有其特征荧光激发和发射光谱;，因此可以用荧光激发和发射光谱的不同来定性地进行物质的鉴定。CV7检测VBA

　　荧光分光光度计的优缺点：CV7检测VBA

　　优点：灵敏度高，可以用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱，不但可以做一般的定量分析, 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化, 从而阐明分子结构与功能之间的关系。CV7检测VBA

　　缺点：CV7检测VBA

　　1、荧光的光强并不高，所以呈线性情况有时不很理想；CV7检测VBA

　　2、某些反应荧光持续的时间较短；CV7检测VBA

　　3、荧光的发散方向不集中，不像透射光那样集中，强度高；CV7检测VBA

　　4、受某些离子的干扰影响，荧光会湮灭，试验速度必须要快。CV7检测VBA

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