酶标仪的工作原理酶标仪工作原理

时间：2025-04-12 18:43:56 来源：作者：

酶标仪（MicroplateReader）是对酶联免疫检测（EIA）实验结果进行读取和分析的专业仪器。酶联免疫反应通过偶联在抗原或抗体上的酶催化显色底物进行的，反应结果以颜色显示，通过显色的深浅即吸光度值的大小就可以判断标本中待测抗体或抗原的浓度。VVi检测VBA

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酶标仪广泛地应用在临床检验、生物学研究、农业科学、食品和环境科学中，特别在近几年中，由于大量的酶联免疫检测试剂盒的应用，使得酶标仪在生殖保健领域中应用越来越广泛，同时促进了生殖健康技术水平提高。VVi检测VBA

目前国内许多计生站系统开展了酶免检测项目，如：乙肝五项、艾滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多数采用目测方法，报出的结果缺乏科学的依据。例如：某弓形虫检测试剂盒中，临界值规定为：阴性对照品的OD值×2.5，通过目测无法判断标本孔的反应颜色是否超过临界值。肉眼进行两孔之间的颜色比较可能还行，但比较一孔的颜色是否超过另一孔颜色的2.5倍就不可能。VVi检测VBA

国内多家权威机构，如卫生部临床检验中心和计划生育系统等多次强调酶标仪的重要性，并要求酶联免疫检测试剂应使用酶标仪判读，酶免试剂的质控也应使用酶标仪，并提供酶标仪测定的原始数据，而各厂家的试剂盒说明书没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是一些实质性的感染和病变（如：肝炎、艾滋病、优生优育等），判读更要求严谨，由误诊引起的纠纷很难处理。另外，住院手术病人术前的丙肝、艾滋等EIA试剂检测是避免因输血引起感染引发的医疗事故纠纷的必要手段，正逐渐被许多单位所采用。VVi检测VBA

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酶标仪怎么保证检测的准确性

    酶标仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器，酶联免疫技术是在免疫学和细胞工程学基础上发展的一种微量检测技术，具有操作简便、灵敏性高等优点，已在食品农药残留、重金属污染、食品添加剂检测等诸多方面表现出了独特的优势，在食品安全检测领域有着广阔的应用前景。VVi检测VBA
    酶标仪产品性能优越，检测精度高，操作简单灵活轻便，已在生物毒素、药物残留、兽药残留、致病微生物、重金属污染和食品安全等方面得到用户的认可。酶标仪即酶联免疫检测仪是酶联免疫吸附试验的专用仪器又称微孔板检测器，一般来说在使用过程中分为半自动和全自动两种，不过这两者的工作原理基本上是一致的，核心都是比色计，也就是用比色法来进行分析。测定一般要求测试液的最终体积在250μL以下，用一般光电比色计无法完成测试，因此对酶标仪中的光电比色计有特殊要求。VVi检测VBA
    光是电磁波，波长100nm~400nm称为紫外光，400nm~780nm之间的光可被人眼观察到，大于780nm称为红外光。人们之所以能够看到色彩，是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色，是因为植物吸收的大部分为红橙光和蓝紫光，但对绿色不吸收，反射出来，所以植物呈现为绿色。酶标仪测定的原理是在特定波长下，检测被测物的吸光值。VVi检测VBA
    随着检测方式的发展，拥有多种检测模式的单体台式酶标仪叫做多功能酶标仪，可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FI)、时间分辨荧光(TRF)、荧光偏振(FP)、和化学发光(Lum)。VVi检测VBA
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酶标仪故障维修案例分析

    酶标仪在临床实验方面应用广泛，用于鉴别乙肝两对半，HIV，鉴定DNA等许多方面，可以说它是临床及医学实验不可或缺的基础设备。VVi检测VBA
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    故障一：测量的结果重现性不好，即使用空板测量误差也在允许的范围之外。VVi检测VBA
    故障分析：检查试剂发现没有问题，检查判定公式也没有问题，检查光路也没有污染。几经周折终于发现卡微板的卡簧在伸缩后没有卡到位，造成微板在测量时在机内晃动影响测量结果不准。VVi检测VBA
    故障二：测量结果OD值偏低。VVi检测VBA
    故障分析：排除完灯的能量值偏低后，检查发现滤光片上有灰尘，用蒸馏水和擦镜纸擦洗干净晾干后故障排除。VVi检测VBA
    测试方法：酶标仪的仪器指标在蕞佳状态，就仪器的精度测试和仪器的线性度介绍几种测试方法。VVi检测VBA
    精度测试：该过程可被用于检测不同微板之间的测量精度。VVi检测VBA
    使用新制备的在0.1％ TWEEN20中的橘黄色甲基填充微孔，在每个微孔中使用不同稀释度的溶剂以便获得一个光密度范围，首先确保每孔注入200mL液体，使用492nm虑光片测量至少3次，对每一微孔进行下列计算：VVi检测VBA
    (1)平均OD值；(2)蕞高和蕞低值；(3)平均值。蕞高和蕞低值之间的差值和百分比。读数范围在0．000到2．000Abs。同一孔平均值，蕞高值和蕞低值之间的差值应该在+／一1．0％和+／一0．010OD范围内。VVi检测VBA
    读数范围在2．000到3．000Abs同一孔平均值，蕞高和蕞低值之间的差值应在+／一1．0％和+／一0．005OD值范围内。读数范围在3．000Abs以上时准确度不符合要求。VVi检测VBA
    酶标仪仪器线性度：仪器的线性度可使用一种溶剂的稀释系列得到。如可在492 nIn处测量在0．1％TWEEN20中的橘黄色甲基的稀释系列。VVi检测VBA
    具体方法如下：在参考光密度计上测量被稀释的溶剂，画出OD值对已知浓度的点图，并画出通过这些点的蕞好的直线。将从系列稀释中测得的吸光度值与该图比较从而计算出各稀释度的浓度。微板中每种稀释度加入250t,-L，对每种稀释至少使用两个样本，以便降低因加样引起的误差。测量微板使用精确测量模式，利用测量得到的平均OD值和每个样本的已知浓度画一条OD浓度的曲线，从系列稀释中测得的吸光值与该曲线比较从而计算出各稀释度的浓度。VVi检测VBA
    对光度记和本仪器，比较计算的浓度，不准确度不应大于以下，使用标准滤光片492nm时吸光度在0．000～2．000Abs+／一1％、2．000～3．000Abs+／一1．5％。使用梯度滤光片492nm时，吸光度在0．000～2．500Abs+／一2％。VVi检测VBA
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