荧光分光光度计基本结构和原理光度计工作原理

时间：2025-04-12 19:11:24 来源：作者：

荧光分光光度计是用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱的一种仪器。其能提供包括激发光谱、发射光谱以及荧光强度、量子产率、荧光寿命、荧光偏振等很多物理参数,从各个角度反映了分子的成键和结构情况。通过对这些参数的测定,不但可以做一般的定量分析,而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化,从而阐明分子结构与功能之间的关系。荧光分光光度计的激发波长扫描范围一般是190~650nm，发射波长扫描范围是200~800nm。可用于液体、固体样品（如凝胶条）的光谱扫描。

由高压汞灯或氙灯发出的紫外光和蓝紫光经滤光片照射到样品池中，激发样品中的荧光物质发出荧光，荧光经过滤过和反射后，被光电倍增管所接受，然后以图或数字的形式显示出来。gg5检测VBA

基本结构和原理，光源与检测器成直角方式安排。gg5检测VBA

1.光源：gg5检测VBA

为高压汞蒸气灯或氙弧灯，后者能发射出强度较大的连续光谱，且在300nm～400nm范围内强度几乎相等，故较常用。gg5检测VBA

2．激发单色器：gg5检测VBA

置于光源和样品室之间的为激发单色器或第一单色器，筛选出特定的激发光谱。gg5检测VBA

3．发射单色器：gg5检测VBA

置于样品室和检测器之间的为发射单色器或第二单色器，常采用光栅为单色器。筛选出特定的发射光谱。gg5检测VBA

4．检测器：gg5检测VBA

一般用光电管或光电倍增管作检测器。可将光信号放大并转为电信号。gg5检测VBA

5．样品室：gg5检测VBA

通常由石英池(液体样品用)或固体样品架(粉末或片状样品)组成。丈量液体时，光源与检测器成直角安排；丈量固体时，光源与检测器成锐角安排。gg5检测VBA

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紫外可见分光光度计详细操作流程及校准方法

　　1、紫外可见分光光度计光度测量　　在模式选择屏幕中选择<1、Photometric光度>选项，将显示参数配置屏幕;　　用GOTOWL键设定测量波长;　　按F2键设定进样控制;　　按START/STOP键时，测量开始，显示测量屏幕;　　如需做空白校正，应在测量前先设置空白样品，然后，按AUTO-ZERO键，将测量值置为OABS(100%);　　2、紫外可见分光光度计校正　　开机预热10分钟足矣;　　放入黑块和标样(没有的自己配)，关闭盖子;　　校0;　　把灯光对着黑块，把透光度调0;　　把灯光对标样，将吸光度调到100%;　　3、参比溶液介绍　　参比溶液又称空白溶液。测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。通常，用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。有时，基体中，虽不含被测物质，但含有别的物质，这时必须保证其不影响测试。经常碰到的是试剂空白中含有被测物质，此时必须经过纯化将其除去。否则将影响测定结果。　　4、紫外可见分光光度计使用注意事项　　1、开机前应先预热15分钟，然后开机自检;　　2、湿度要控制在75%左右，温度在5～30度之间;　　3、仪器要稳压电源，接地要好。并且避免阳光直接照射;　　5、常见故障及处理方法　　光门不能完全关闭：修复光门部件，使其完全关闭;　　透过率“100%”旋到底了。解决方法：重新调整“100%”旋钮;　　仪器严重受潮：可打开光电管暗盒，用电吹风吹上一会儿使其干燥，并更换干燥剂;以上为紫外可见分光光度计的具体操作方法及使用注意事项，希望能给予您帮助。gg5检测VBA

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如何选择分光光度计

　　由于分光光度计是一种常用的实验室分析仪器，款式和价格都是多样化的，因此如何选择一款合适的分光光度计就显得尤为重要了。下面简单说一下如何选择分光光度计。gg5检测VBA

　　一、选择可满足使用者长期分析要求的仪器即可：gg5检测VBA

　　尽管分光光度计种类繁多，但不外乎：简易型、中档型和高档型三大类；gg5检测VBA

　　（1）简易型仪器及其特点：gg5检测VBA

　　结构：这种类型的仪器多为单光束型，即只有一束光照射到样品室内；光源一般仅有钨灯；样品支架一般为推拉式四联池架；波长选择多为手动查找，重复性差；狭缝为一个固定宽度模式；光学性能指标较低；检测器多为光敏二极管；显示器多为机械表头或数码管显示器，数据处理器一般没有。此类仪器生产以国内厂家居多。gg5检测VBA

　　测量模式：多为定点（固定波长）吸光度或透过率测量方式，基本不能进行波长扫描测量。gg5检测VBA

　　适应范围：小型实验室及示范教学，分析样品相对简单，测试结果精度要求不高。gg5检测VBA

　　（2）中档型仪器及其特点：gg5检测VBA

　　结构：此类仪器多为双光束型或准双光束型，但也有单光束仪器型；光源有钨灯和氘灯；样品池支架为两个固定式，分别是样品通道和参比通道；波长按照设定模式自动查找或扫描；狭缝多数仍为2nm固定宽度模式,也有1.5nm狭缝宽度的；检测器多数是硅光二极管，但也有少数用光电倍增管的；光学性能相对较高，其中光栅的技术指标尤为重要，较佳的光栅为凹面型，为此无论在分辨率还是在杂散光方面指标要优于简易型仪器；显示器为液晶式或连接电脑，数据处理可由仪器自身具有的或外接计算机处理。并有一定的测量附件。gg5检测VBA

　　测量模式：透过率、吸光度、浓度直读、单光束；单点及扫描均可。gg5检测VBA

　　适应范围：此类仪器基本可满足大多实验室分析需要。gg5检测VBA

　　（3）高档型仪器及特点：gg5检测VBA

　　除了中档仪器的特点外，主要是光学系统的设计和制造工艺水平更高了，比如使用了大尺寸的凹面光栅，并且光栅刻槽数大于1800条/mm；波长检测范围有的仪器在近红外区已经超过1100nm，可达到2600nm；狭缝均为连续可调型，以适应高分辨率的需要，波长扫描速度的档位也增加了，检测器均使用高灵敏度的光电倍增管和红外检测器；数据处理目前基本是电脑来执行；衡量一台仪器的另外一个指标是看此仪器是否具有丰富的附属测量器件，如偏振附件、积分球附件、反射附件、自动进样器附件、色度分析软件、薄膜附件等等。gg5检测VBA

　　测量模式：透过率、吸光度、浓度直读、反射方式、能量方式，单点、扫描均可；gg5检测VBA

　　适应范围：科研、光学产品的检测、生化样品检测、复杂样品检测等。不但可以测液态样品，也可测固态样品。gg5检测VBA

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