紫外可见分光光度计的构造原理及维修保养

时间：2025-04-12 21:12:03 来源：作者：

紫外可见分光光度计的构造原理

    紫外及可见光分光光度计的可测波长范围为200一1000 nm，也有波长范围为200- 400 nm的紫外分光光度计，但前者较为普遍。紫外及可见光分光光度计的构造原理与可见光分光光度计(如721型分光光度计)相似。由于玻璃吸收紫外光，因此单色器要用石英棱镜或光栅。
    (一)光(light source)
    有钨丝灯及氢灯(或氛灯)两种。可见光区(360一1000 nm)使用钨丝灯;紫外光区 (200一360 nm)则用氢灯或氛灯。
    (二)吸收池(absorption cell)
    由于玻璃吸收紫外光.吸收池要用石英材质。
    (三)检浏器(detector)
    检侧器使用两只光电管，一为氧化艳光电管，用于625一1000 nm波长范围;另一只是锑艳光电管，用于200一625 nm波长范围。光电倍增管亦为常用的检测器，其灵敏度比一般的光电管高2个数量级。
    紫外及可见光分光光度计分单光束和双光束型。单光束型仪器使用前一般需要预热以使仪器稳定，缺点是难以消除与补偿由于光源与电子测量系统不稳定等所引致的误差。双光束型仪器能够消除与补偿由于光源、电子测量系统不稳定等所引致的误差，所以其测盘的精确度就提高了。
    其工作原理可描述为:由光源(钨丝灯氘灯，根据波长而变换使用)发出的光经人口狭缝及反射镜反射至石英棱镜或光栅，色散后经过出口狭缝而得到所需波长的单色光束。然后由反射镜反射至由马达转动的调制板及扇形镜上。当调制板以一定转速旋转时，时而使光束通过，时而挡住光束，因而调制成一定频率的交变光束。之后扇形镜在旋转时，将此交变光束交替地投射到参比溶液(空白溶液)及试样溶液上，后面的光电倍增管接受通过参比溶液及为试样溶液所减弱的交变光通量，并使之转变为测量信号。此信号经放大并用解调器分离及整流，然后以电位器自动平衡此两直流信号的比率，并依照记录器记录得到吸收曲线。6Rq检测VBA

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紫外可见分光光度计维护要点

　　紫外可见分光光度计引用新型技术，其功能强大，采用单色器技术，波长范围190-1100nm，是各种涉及水和废水分析领域的通用仪器，应用范围包括市政和工业废水，饮用水，加工过程用水，地表水，冷却水和锅炉补给水等。6Rq检测VBA

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　　紫外可见分光光度计应用：
　　在水和废水监测中的应用，对于一个水系的监测分析和综合评价，一般包括水相（溶液本身）、固相（悬浮物、底质）、生物相（水生生物）。在水质的常规监测中，紫外可见分光光度法占有较大的比重。由于水和废水的成分复杂多变，待测物的浓度和干扰物的浓度差别很大，在具体分析时必须选择好分析方法。
　　在农产品和食品分析中可用于检测的组分或成分有蛋白质、赖氨酸、葡萄糖、维生素C、硝酸盐、亚硝酸盐、砷、汞等;
　　在植物生化分析中可用于检测叶绿素、全氮和酶的活力等；
　　在饲料分析中可用于检测烟酸、棉酚、磷化氢和甲酯等。
　　紫外可见分光光度计维护要点：
　　一、温度和湿度是影响仪器性能的重要因素。他们可以引起机械部件的锈蚀，使金属镜面的光洁度下降，引起仪器机械部分的误差或性能下降;造成光学部件如光栅、反射镜、聚焦镜等的铝膜锈蚀，产生光能不足、杂散光、噪声等，甚至仪器停止工作，从而影响仪器寿命。维护保养时应定期加以校正。应具备四季恒湿的仪器室，配置恒温设备，特别是地处南方地区的实验室。
　　二、环境中的尘埃和腐蚀性气体也会影响机械系统的灵活性、降低各种限位开关、按键、光电偶合器的可靠性，也是造成必须学部件铝膜锈蚀的原因之一。因此必须定期清洁，保障环境和仪器室内卫生条件，防尘等。
　　三、仪器使用一定周期后，内部会积累一定量的尘埃，可以由维修工程师或在工程师指导下定期开启仪器外罩对内部进行除尘工作，同时将各发热元件的散热器重新紧固，对光学盒的密封窗口进行清洁，必要时对光路进行校准，对机械部分进行清洁和必要的润滑，最后，恢复原状，再进行一些必要的检测、调校与记录。6Rq检测VBA

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紫外可见分光光度计在生命科学中的应用

　　目前,紫外可见分光光度计的应用主要是在定量分析方面。先从生命科学领域的应用来介绍。紫外可见分光光度计在生命科学中应用非常广泛。主要的是以下5个方面。6Rq检测VBA

　　1.蛋白质分析工作中6Rq检测VBA

　　紫外可见分光光度计在蛋白质的分析中,主要的是作蛋白质含量检测;一般是在蛋白质的吸收峰上作吸光度测定。因为蛋白质对紫外光的主要吸收波长为280nm,所以,采用光度测量模式,将仪器的波长GOTO到蛋白质的最大吸收峰波长280nm上,测试其吸光度大小,就可完成对蛋白质的定量检测。6Rq检测VBA

　　2.核酸分析工作中6Rq检测VBA

　　紫外可见分光光度计在核酸分析中的应用,主要是用来对核酸的定量检测;因为核酸的吸收峰在260nm。我们只要采用光度测量模式,将紫外可见分光光度计的波长GOTO到核酸的最大吸收峰260nm上,测试其吸光度大小就是了。6Rq检测VBA

　　3.氨基酸分析工作中6Rq检测VBA

　　紫外可见分光光度计在氨基酸分析中的应用,主要是用来对氨基酸的定量检测。因为氨基酸对紫外光的主要吸收波长为230nm,所以,我们只要采用光度测量模式,将紫外可见分光光度计仪器的波长GOTO到氨基酸的最大吸收峰230nm上,就可测试其吸光度大小,从而计算出氨基酸的含量。但是,因为氨基酸分析时,一般是将它溶解在水中,而水在230nm附近有很多干扰吸收线,所以,在用紫外可见分光光度计对氨基酸分析检测时,要注意防止干扰的问题。此外,还需注意:只有少数氨基酸有紫外吸收,多数氨基酸无紫外吸收或很弱,测定时要衍生化后再测。6Rq检测VBA

　　4.糖类分析测试工作中6Rq检测VBA

　　紫外可见分光光度计在糖的分析中,主要是作定量检测。因为糖对紫外光的主要吸收波长为218nm,所以,对糖类进行分析时,只要采用光度测量模式,将紫外可见分光光度计仪器的波长GOTO到氨基酸的最大吸收峰218nm上,就可测试其吸光度大小,从而计算出糖的含量。6Rq检测VBA

　　5.多糖分析测试工作中6Rq检测VBA

　　紫外可见分光光度计在多糖的分析中,主要也是作定量检测。因为多糖对紫外光的主要吸收波长为206nm,所以,我们只要采用光度测量模式,将紫外可见分光光度计仪器的波长GOTO到多糖的最大吸收峰206nm上,就可测试其吸光度大小,从而计算出多糖的含量。6Rq检测VBA

　　但是多糖的分析难度很大。因为,在206nm处的时候,光源(氘灯)的能量已经很弱,仪器光学系统的能量输出也很低,光电倍增管的灵敏度也很低,206nm左右的干扰也很大。所以,用紫外可见分光光度计作多糖的分析是很难的事,目前许多科学家正在研究中。6Rq检测VBA

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