液相色谱仪的应用，可用于高沸点、热稳定性差以及具有生理活性物质的分析。一般来说，沸点在450℃以下，相对分子质量小于450的有机物可用液相色谱仪分析，但这些物质只占有机物的15%～20%，其余的80%～85%有机物原则上都可采用高效液相色谱仪分析。bRI检测VBA
色谱柱的使用和维护，色谱柱的正确使用和维护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。bRI检测VBA
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在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。调节流速太快，避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料，因此在调节流速时应该缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。bRI检测VBA
反冲色谱柱，一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效，预柱和保护柱，选择使用适宜的流动相（尤其是pH），以避免固定相被破坏。bRI检测VBA
有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避免分析柱中的硅胶基质被溶解。bRI检测VBA
避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。bRI检测VBA
液相色谱仪的基本结构，由输液系统、进样系统、分离系统、检测系统和数据处理系统等组成。bRI检测VBA
工作原理，利用混合物各组分在固定相和流动相中溶解、分配或吸附等化学作用性能的差异，使各组分在作相对运动的两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。bRI检测VBA
从液相色谱仪工作流程中看到，色谱柱是实现分离的核心部件，要求柱效高、柱容量大和性能稳定。柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用条件有关。bRI检测VBA
色谱填料：经过制备处理后，用于填充色谱柱的物质颗粒，通常是5-10粒径的球形颗粒。bRI检测VBA
色谱柱管：内部抛光的不锈钢管。典型的液相色谱分析柱尺寸是内径4.6mm，长250mm。bRI检测VBA
色谱柱：也称固定相，是将色谱填料填充到色谱柱管中所构成的，色谱柱的填充，干法填充：在硬台面上铺上软垫，将空柱管上端打开垂直放在软垫上，用漏斗每次灌入50-100mg填料，然后垂直台面墩10-20次。bRI检测VBA
湿法填充：又称淤浆填充法，使用专门的填充装置。bRI检测VBA
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液相色谱仪维护应该注意的事项
液相色谱仪根据固定相是液体或是固体，又分为液-液色谱及液-固色谱。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器、信号记录系统等部分组成。与经典液相柱色谱装置比较，具有高效、快速、灵敏等特点。
1、 泵。
泵是液相色谱仪的心脏。处于良好工作状态的泵，基线平稳，保留时间重现性好，梯度洗脱时压力变化缓慢而且平稳。
1)选择优质的溶剂和试剂，在进入仪器前用 0.45um 膜过滤，并进行脱气处理。
2)泵开始使用时，一定要用合适的流动相彻底清洗干净。
3)定期检查并更换在线过滤片及有关的垫圈，经常清洗进液处的微孔滤头。
4)改变流动相时，应注意沉淀的产生，以防止泵堵塞。
2、色谱柱。
色谱柱是化合物分离的关键。保养良好的色谱柱具有很高的塔板数，基线平稳。
1)色谱柱比较娇气不能够碰撞、弯曲或强烈震荡;安装时要保证阀件或管路的清洁。
2)流动相在使用前必须进行脱气处理，尽量不使用或少使用高粘度的流动相。
3)在满足灵敏度的前提下，尽可能的使用小进样量。如果样品比较脏，要进行净化或提纯处理。
4)分析结束后要清洗掉进样阀中残留的样品，并用流动相或适当的溶剂清洗色谱柱。
5)如长期不用，用适当的有机溶剂保存并封闭或定期补充合适的流动相。
3 、检测器
分析完成后，马上关闭检测器。
4 、进样器
分析结束后反复冲洗进样口，防止样品的交叉污染或堵塞。bRI检测VBA
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对液相色谱仪色谱工作站硬件的要求
气相色谱是对气体物质或可以在一定温度下转化为气体的物质进行检测分析。由于物质的物性不同，其试样中各组分在气相和固定液液相间的分配系数不同，当汽化后的试样被载气带入
色谱柱中运行时，组分就在其中的两相间进行反复多次分配，由于固定相对各组份的吸附或溶解能力不同，虽然载气流速相同，各组分在色谱柱中的运行速度就不同，经过一定时间的流动后，便彼此分离，按顺序离开色谱柱进入检测器，产生的讯号经放大后，在记录器上描绘出各组份的色谱峰。根据出峰位置，确定组分的名称，根据峰面积确定浓度大小。这就是气象
色谱仪的工作原理。
对液相色谱仪色谱工作站硬件的要求主要有以下五点：bRI检测VBA
1. 对工作站可靠性的要求。目前很多国产色谱工作站硬件在电路设计和元器件选用上存在缺陷，造成硬件的稳定性差。有部分硬件在保修期内反复出问题，极大的损坏了品牌形象。bRI检测VBA
2. 对量程范围的要求。在制备色谱仪和离子色谱仪等领域，量程范围通常会超过1V，达到5V或者更高。这就要求硬件具有拓展性，稍作更改既能满足上述要求。bRI检测VBA
3. 对采样频率和最小分辨率的要求。毛细管电泳色谱，超高效液相色谱仪等快速分析设备的发展；痕量分析需求的增多。bRI检测VBA
4. 对兼容性的要求。当前有些工作站硬件接上电脑后，出现系统死机，工作站死机，系统重启，鼠标乱跳等现象。这些现象需要从开发时，在源头上规避。bRI检测VBA
5. 对通讯接口的要求。为了跟上计算机主机的变化，目前国内各厂家都把USB通讯作为一大亮点。然而USB通讯本身存在信号易中断的缺陷，目前还没有哪个厂家真正刻服了这个缺陷，所以建议在USB通讯之外，提供串行口的选择。当然，选用网口，顺应网络化数据采集和仪器控制的需求是当前建议的选择，这一趋势也会随着科学技术的不断发展得以快速进步。bRI检测VBA
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