色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。1tw检测VBA
构造1tw检测VBA
色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。1tw检测VBA
柱管多用不锈钢制成,压力不高于70 kg/cm2 时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。1tw检测VBA
为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。1tw检测VBA
也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛光相同。还有使用熔融硅或玻璃衬里的,用于细管柱。1tw检测VBA
色谱柱两端的柱接头内装有筛板,是烧结不锈钢或钛合金,孔径0.2~20μm(5~10&μm),取决于填料粒度,目的是防止填料漏出。1tw检测VBA
色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类,尺寸规格也不同:1tw检测VBA
①常规分析柱(常量柱),内径2~5mm(常用4.6mm,国内有4mm和5mm),柱长10~30cm;1tw检测VBA
②窄径柱(narrow bore,又称细管径柱、半微柱semi-microcolumn),内径1~2mm,柱长10~20cm;1tw检测VBA
③毛细管柱(又称微柱microcolumn),内径0.2~0.5mm;1tw检测VBA
④半制备柱,内径>5mm;1tw检测VBA
⑤实验室制备柱,内径20~40mm,柱长10~30cm;1tw检测VBA
⑥生产制备柱内径可达几十厘米。柱内径一般是根据柱长、填料粒径和折合流速来确定,目的是为了避免管壁效应。1tw检测VBA
性能评价1tw检测VBA
色谱柱的性能除了与固定相性能有关外,还与填充技术有关。1tw检测VBA
在正常条件下,填料粒度>20μm时,干法填充制备柱较为合适;颗粒<20μm时,湿法填充较为理想。1tw检测VBA
填充方法一般有4种:1tw检测VBA
①高压匀浆法,多用于分析柱和小规模制备柱的填充;1tw检测VBA
②径向加压法;③轴向加压法,主要用于装填大直径柱;1tw检测VBA
④干法。柱填充的技术性很强,大多数实验室使用已填充好的商品柱。1tw检测VBA
必须指出,高效液相色谱柱的获得,装填技术是重要环节,但根本问题还在于填料本身性能的优劣,以及配套的色谱仪系统的的结构是否合理。1tw检测VBA
无论是自己装填的还是购买的色谱柱,使用前都要对其性能进行考察,使用期间或放置一段时间后也要重新检查。1tw检测VBA
柱性能指标包括在一定实验条件下(样品、流动相、流速、温度)下的柱压、理论塔板高度和塔板数、对称因子、容量因子和选择性因子的重复性,或分离度。1tw检测VBA
一般说来容量因子和选择性因子的重复性在±5%或±10%以内。1tw检测VBA
进行柱效比较时,还要注意柱外效应是否有变化。1tw检测VBA
一份合格的色谱柱评价报告应给出柱的基本参数,如柱长、内径、填料的种类、粒度、色谱柱的柱效、不对称度和柱压降等。1tw检测VBA
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标签: 色谱柱
色谱柱标签:色谱柱的构造性能_色谱柱组合标题:
液相色谱柱使用过程中应当着重注意的问题
色谱柱在色谱仪分析系统中起着分离作用,是色谱分析的核心部件。正确使用和维护色谱柱尤为重要,使用不当就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。以下从几个方面简单介绍液相色谱柱在使用过程中应当着重注意的问题。1tw检测VBA
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一、避免压力和温度的急剧变化1tw检测VBA
温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,以保持色谱柱内填料的稳定性。1tw检测VBA
二、避免直接改变溶剂的组成1tw检测VBA
在需要改变检测样品溶液组成是,应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。且在使用次洗脱能力强的洗脱液冲洗色谱柱时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。1tw检测VBA
三、避免色谱柱反冲1tw检测VBA
一般来说色谱柱不能反冲,只有色谱柱使用说明书上标明该柱可反冲才可以反冲除去留在柱头上的杂质。否则,反冲色谱柱的影响是迅速降低柱效。1tw检测VBA
四、避免流动相使用不当而破坏固定相1tw检测VBA
选择使用适宜的流动相(尤其是pH),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一段预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶"饱和",避免分析柱中的硅胶基质被溶解。1tw检测VBA
五、禁止样品未经处理直接进入色谱柱1tw检测VBA
避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。1tw检测VBA
六、禁止将缓冲溶液长时间存放在色谱柱内1tw检测VBA
保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。1tw检测VBA
七、禁止色谱柱未经处理直接封存1tw检测VBA
色谱柱使用完成之后须使用相宜溶剂进行清洁处理,例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡;当采用盐缓冲溶液作流动相时,使用完后应用无盐流动相冲洗;含卤族元素(氟、氯、溴)的化合物可能会腐蚀不锈钢管道,不宜长期与之接触;装在液相色谱仪上的色谱柱如不经常使用,应每隔4-5天开机冲洗15分钟。1tw检测VBA
标签: 液相色谱柱
液相色谱柱液相色谱柱使用过程中应当着重注意的问题_液相色谱柱
关于色谱柱的使用与维护
在日常分离分析工作中,色谱柱的正确使用和维护十分重要,色谱柱使用是否得当,直接影响色谱柱的寿命,在色谱操作过程中,需要注意下列问题,以维护色谱柱。1tw检测VBA
1、柱子在装卸、更换时,动作要轻,接头拧紧要适度。必须防止较强的机械振动,以免柱床产生空隙。1tw检测VBA
2、如果仪器用来做常规分析,样品种类有限,但分析次数多,则不妨为每一类常规分析配置一根专用柱,这样有助于延长柱子的寿命。1tw检测VBA
3、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。1tw检测VBA
4、应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。1tw检测VBA
5、如使用柱温控制装置时,应注意在通人流动相后才能升温。1tw检测VBA
6、一般说来色谱柱不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。1tw检测VBA
7、选择使用适宜的流动相,以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一个预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解。1tw检测VBA
8、避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注人柱内,需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一个保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。1tw检测VBA
9、 经常用强溶剂冲洗色谱柱,清除保留在柱内的杂质。在进行清洗时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50-75mL。1tw检测VBA
10、保存色谱柱时应将柱内充满乙腈或甲醇,柱接头要拧紧,防止溶剂挥发干燥。绝对禁止将缓冲溶液留在柱内静置过夜或更长时间。1tw检测VBA
11、色谱柱使用过程中,如果压力升高,一种可能是烧结滤片被堵塞,这时应更换滤片或将其取出进行清洗;另一种可能是大分子进人柱内,使柱头被污染;如果柱效降低或色谱峰变形,则可能柱头出现塌陷,死体积增大。1tw检测VBA
12、在完成分离分析工作之后,不应立即停机,需及时对色谱分析系统进行冲洗,一般0.5h以上,以除去色谱柱内的杂质。1tw检测VBA
标签: 色谱柱
色谱柱关于色谱柱的使用与维护_色谱柱