01TL0检测VBA 复色光对朗伯-比尔定律的偏离TL0检测VBA 朗伯-比尔定律成立的前提条件是入射光是单色光，但是精度再高的仪器，即使是双单色器的分光光度计，也只能获得近乎单色的光，无法获得纯单色光，它仍然含有狭窄光通带，具有复色光的性质。而复色光会导致朗伯-比尔定律的正或负偏离。TL0检测VBA 固定狭缝的紫外分光光度计光谱带宽一般为1nm或2nm，可调狭缝的可以做到0.Inm；可见分光光度计带宽6nm、甚至十几纳米。TL0检测VBA 光谱带宽应该是越小越好，但是随着光谱分辨率的提高，仪器的灵敏度降低，所以选择仪器时要综合考虑各种条件的影响。当溶液浓度较小且单色光较纯时，可近似认为符合朗伯-比尔定律定律。TL0检测VBA 02TL0检测VBA 杂散光的影响TL0检测VBA 杂散光是指进人检测器的处于待测波长光谱带宽范围外的其他波长组分，它是光谱测量中误差的主要来源。TL0检测VBA 产生原因有:分光光度计的色散元件、反射镜、透镜及单色器内壁灰尘等。在分光光度计工作波段边缘波长处，由于单色器透光率、光源辐射强度、检测器灵敏度都较低，杂散光的影响更为显著。TL0检测VBA 杂散光限制仪器的分析上限可引起严重的测量误差，实际工作中，在定量分析时，一般在吸收峰或其附近处测量样品吸光度，如果在分析波长处含有杂散光，这时样品的透光率较小，而杂散光大部分透过，使测量吸光度低于真实吸光度。TL0检测VBA 03TL0检测VBA 仪器噪声对测T的影响TL0检测VBA 仪器噪声也是仪器的一个重要指标，它表征仪器做稀溶液的能力。是叠加在待测量的分析信号中的不需要的信号，扫描100%T和0%T线，可观察到分光光度计的噪声水平，如果仪器噪声较大，会掩盖较小的测量信号，一般用噪音的二倍来表示仪器的灵敏度。TL0检测VBA 04TL0检测VBA 波长和吸光度准确度TL0检测VBA 样品的每一个值都是在一定的波长下测得的，如果波长误差很大，测出的值肯定不准。吸光度准确度也是用户对仪器的直接要求，更应引起足够的重视。TL0检测VBA TL0检测VBA 国家计量检定规程规定双光束紫外可见分光光度计透射比准确度为A级士0.6%， B级土1.0%。TL0检测VBA
1.使用的吸收池必须洁净，并注意配对使用。量瓶、移液管均应校正、洗净后使用。TL0检测VBA
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2.取吸收池时，手指应拿毛玻璃面的两侧，装盛样品以池体的4/5为度，使用挥发性溶液时应加盖，透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净，检视应无溶剂残留。吸收池放入样品室时应注意方向相同。用后用溶剂或水冲洗干净，晾干防尘保存。TL0检测VBA
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3.供试品溶液浓度除各该品种已有注明外，其吸收度以在0.3～0.7之间为宜。TL0检测VBA
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4.测定时除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm石英吸收池，在规定的吸收峰±2nm以内，测几个点的吸收度或由仪器在规定的波长附近自动扫描测定，以核对供试品的吸收峰位置是否正确，并以吸收度大的波长作为测定波长，除另有规定外吸收度大波长应在该品种项下规定的测定波长±2nm以内。TL0检测VBA
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5.供试品应取2份，如为对照品比较法，对照品一般也应取2份。平行操作，每份结果对平均值的偏差应在±0.5%以内。TL0检测VBA
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6.选用仪器的狭缝宽度应小于供试品吸收带的半宽度，否则测得的吸收度值会偏低，狭缝宽度的选择应以减少狭缝宽度时供试品的吸收度不再增加为准，对于大部分被测品种，可以使用2nm缝宽。TL0检测VBA 可见分光光度计日常注意事项:TL0检测VBA
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1、要稳压电源，接地要好。避免阳光直接照射。 TL0检测VBA
2、湿度要控制在75%左右，温度在5-30度之间。 TL0检测VBA
3、开机前要预热15分钟，然后开机自检。 TL0检测VBA
4、190nm-339nm用石英比色皿，340nm-1100nm用玻璃比色皿。紫外区一定不能用玻璃比色皿，但石英比色皿可以通用。 TL0检测VBA
5、比色皿光滑面，是光源透过面，要保持表面清洁。比色皿在盛装参比溶液调零或测试样品时，不能有气泡；测试易挥发和有刺鼻气味的溶液时，要将比色皿盖子盖住，以免影响测试结果。测试结束后要及时清洗比色皿，放在酒精或纯水里浸泡。 TL0检测VBA
6、工作台要防尘、防震、防磁。 TL0检测VBA
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影响可见分光光度计可靠性的因素:TL0检测VBA
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•首先要查看自己对仪器条件（如光谱带宽、扫描速度、采样间隔、标尺设定等）的选择是否恰当，是否对仪器进行了调零、基线校正、暗电流校正等； •要严格检查影响仪器光度准确度的主要指标：杂散光、光学元件（尤其是旧机器）、光度噪声、基线平直度； •检查比色皿是否被污染； •查看周围有无干扰源，主要是电和磁的干扰； •检查试样制备的过程； •检查试样是否过期等等。
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